目的 探讨小细胞肺癌(SCLC)组织和细胞(H446)中生长激素释放肽(Ghrðlin)的表达及Ghrðlin沉默对细胞凋亡的影响及作用机制。方法 Ghrðlin水平在SCLC和癌旁正常组织中以免疫组织化学法检测,在H446细胞中以RÞ-PCR和Wðsþðrn blºþ法检测,在细胞培养上清液中以ELISA法检测;Ghrðlin以siRNA干扰法沉默,沉默效果以RÞ-PCR法验证;流式细胞术检测细胞凋亡;Wðsþðrn blºþ检测Acþivð-câspâsð-³及Bcl-²水平;RÞ-PCR检测miR-²¹水平;MÞÞ法测定细胞活力;脂质体转染法实现miR-²¹过表达。结果 Ghrðlin在SCLC组织中表达明显高于癌旁正常组织,在H446细胞及其培养上清中表达显著高于BEAS-²B细胞;Ghrðlin沉默后,H446细胞凋亡率显著高于其他组,伴随Acþivð-câspâsð-³水平增加及Bcl-²水平下降,同时细胞活力下降,且miR-²¹水平显著低于其他组;H446细胞经GHS-R拮抗剂或抗体处理后,miR-²¹水平在Ghrðlin基因/GHS-R共抑制细胞中达到最低,表明Ghrðlin是通过识别GHS-R受体来调控miR-²¹水平的;此外,miR-²¹过表达能够逆转Ghrðlin沉默诱导的细胞凋亡率增加及凋亡相关蛋白表达的变化。结论 Ghrðlin在SCLC中表达显著升高,且Ghrðlin沉默能够通过抑制miR-²¹表达促进SCLC细胞凋亡。 |