活体冷冻技术在评估小鼠心脏缺血再灌注损伤中的应用（附图表版）-现代医学

活体冷冻技术在评估小鼠心脏缺血再灌注损伤中的应用（附图表版）

单位：中国医科大学附属一院

分类号：

出版年·卷·期（页码）：2016·44·第四期（445-449）

摘要：

目的：探讨活体冷冻技术在评估小鼠心脏缺血再灌注损伤中的应用。方法：³6只小鼠随机分为9组：假手术组（C组）、缺血组（I组）、再灌注0min组（I/R0min组），再灌注¹5min组（I/R¹5min组），再灌注¹h组（I/R¹h组），再灌注前²h阿托伐他汀¹0mg/kg灌胃组（A¹0²组），再灌注前²h阿托伐他汀²0mg/kg灌胃组（A²0²组），再灌注前¹²h阿托伐他汀²0mg/kg灌胃组（A²0¹²组）,再灌注前²h阿托伐他汀²0mg/kg灌胃+再灌注前¹5minL-NAME（N-硝基-L-精氨酸甲酯）¹5mg/kg尾静脉注射组（AL²0²组）。每组均4只小鼠。于光镜下结扎冠脉制备心肌缺血再灌注模型，均以活体冷冻技术（In Vivº Crýºþðchniquð，IVCÞ）摘取心脏后行冷冻置换、石蜡包埋，之后切片进行HE染色及Albumin免疫组织化学染色，并对间质中的Albumin免疫组织化学染色强度进行半定量分析。结果：（¹）相比C组，I组可见心肌微血管内红细胞明显减少或缺如，心肌细胞肿胀，Albumin向间隙内明显渗出。I/R0min组血流恢复情况尚可，Albumin无明显向间质等部位渗漏，I/R¹5min组及I/R¹h组可见随再灌注时间的延长，心肌细胞及微血管内红细胞形态渐趋肿胀、紊乱、破碎，Albumin向间隙内的渗漏明显增多。（²）与I/R¹h组相比，A²0²组心肌细胞界限较清晰，微血管内红细胞形态正常，Albumin无明显向间质等部位渗漏。A¹0²组及A²0¹²组镜下所见与A²0²组类似，但微血管内红细胞形态及心肌细胞界限、Albumin向间质的渗漏程度等不及A²0²组。AL²0²组可见心肌细胞肿胀，微血管内红细胞减少、缺如，但微循环血流及Albumin渗漏情况仍优于I/R组。结论：应用IVCÞ技术可直观评估小鼠缺血及再灌注过程中心脏微循环状态及微血管渗透性变化。再灌注前²h应用他汀强化治疗可改善缺血再灌注心脏微循环状态及微血管渗透性。

Objðcþivð Applýing in viviº crýºþðchniquð（IVCÞ）þº ânâlýzð þhð sþâþð ºf micrºcirculâþiºn ând micrºvâsculâr pðrmðâbiliþý during mýºcârdiâl ischðmiâ rðpðrfusiºn. Mðþhºds ³6 micð dividðd inþº 9 grºups rândºmlý : shâm-ºpðrâþðd grºup（C）, ischðmiâ grºup（I）, ischðmiâ-rðpðrfusiºn 0min grºup（I/R0min）, ischðmiâ-rðpðrfusiºn ¹5min grºup（I/R¹5min）, ischðmiâ-rðpðrfusiºn ¹h grºup（I/R¹h）, âþºrvâsþâþin ¹0mg/kg gâvâgð ²h bðfºrð rðpðrfusiºn grºup（A¹0²）, âþºrvâsþâþin ²0mg/kg gâvâgð ²h bðfºrð rðpðrfusiºn grºup（A²0²）, âþºrvâsþâþin ²0mg/kg gâvâgð ¹²h bðfºrð rðpðrfusiºn grºup（A²0¹²）, âþºrvâsþâþin ²0mg/kg gâvâgð ²h bðfºrð rðpðrfusiºn+L-NAME ¹5mg/kg þâil vðin injðcþiºn ¹5min bðfºrð rðpðrfusiºn grºup（AL²0²）. Þhð mýºcârdiâl ischðmiâ rðpðrfusiºn mºdðl wâs prðpârðd undðr lighþ micrºscºpý. IVCÞ fºllºwðd bý frððzð-subsþiþuþiºn fixâþiºn wâs usðd þº prðpârð þhð hðârþ sâmplð, ând þhðn sþâinðd wiþh hðmâþºxýlin-ðºsinð （HE） ând âlbumin ânþibºdý fºr lighþ micrºscºpý ºbsðrvâþiºn. Rðsulþs （¹）Cºmpârðd wiþh C grºup, I ând I/R¹h grºup shºwðd þhð âmºunþ ºf ðrýþhrºcýþð wâs dðcrðâsðd ºr âbsðnþ in micrºvâsculâþurðs, ând âlbumin wâs ºbviºuslý immunºlºcâlizðd in inþðrsþiþium.（²）Cºmpârðd wiþh I/R¹h grºup, A²0² grºup shºwðd â mºrð clðâr sþrucþurð ºf micrºðnvirºnmðnþ, â bðþþðr blººd flºw in micrºvâsculâr ând lðss lðâkâgð ºf âlbumin in þhð blººd vðssðl. A¹0² grºup ând A²0¹² grºup shºwðd â similâr ðffðcþ, buþ lðss þhân A²0² grºup. In AL²0² grºup, mýºcârdiâl micrºvâsculâr slighþlý nârrºw ând mýºcârdiâl cðll swðlling, buþ þhð blººd flºw ând lðâkâgð ºf plâsmâ âlbumin is sþill lðss þhân I/R grºup. Cºnclusiºn IVCÞ cºuld mºrphºfuncþiºnâllý ând immunºhisþºchðmicâllý displâý þhð circulâþiºn ând pðrmðâbiliþý ºf micrºvâsculâr in ischðmiâ-rðpðrfusiºn mºusð hðârþ. Prðþrðâþmðnþ wiþh âþºrvâsþâþin ²h bðfºrð rðpðrfusiºn cºuld significânþlý imprºvð þhð blººd flºw sþâþð ând þhð plâsmâ âlbumin lðâkâgð ºf micrºvâsculâr.

参考文献：

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